顯微鏡鏡象亮度以及視野大小的關鍵所在

鏡象亮度指的是顯微鏡中所看到的物象的亮暗程度。要看清楚物體的細節，必須要求一定的亮度，也就是鏡象亮度，它與數值孔徑的平方成正比，與總放大倍數的平方成反比。在物鏡相同的情況下，使用5X的目鏡比使用10X的目鏡，鏡象亮度要大四倍，所以要想使鏡象亮度大，可以使用大數值孔徑的物鏡，配以低放大倍數的目鏡。

比方說，使用40X的N.A.為0.65的物鏡配以5X的目鏡和使用10x的N.A.為0.25的物鏡配以20X的目鏡相比較，雖然總放大率都是200X，可是前者的鏡象亮度比后者大六點八倍。在實際觀察物體的時候，并不是鏡象越亮越好，假如鏡象亮度太大，一通過標本的光線太強，會影響圖象的反差且不利于保護眼睛視力，因此要求將鏡象亮度調至適中，同時根據不同標本厚度加以調節，對于厚的標本可以適當增加亮度，反差好的標本也可適當增加亮度。

而且所謂的視野指的是是視場，說白了就是顯微鏡一次所能觀察到被檢標本的范圍。通常來講顯微鏡的視野是很小的，它的大小和顯微鏡的總放大倍數成反比，總放大倍數越大的時候，顯微鏡的視野越小。所以顯微鏡尤其是高放大倍數情況下，不可能在一個視野內看到整個標本，只能觀察到標本的某個部位。假如需妥觀察標本的其他部位的時候，一定要利用移動器移動標本，使標本中的各部分依次進入視野內，輪流觀察。

光學顯微鏡的幾個主要性能之間有著一定的相互關系。是不是看清楚小的物體或細節，主要決定于物鏡的分辨率，也就是數值孔徑，并不決定于倍數，認為倍數越高看得越清楚的想法是不完全正確的。假如不增高分辨率。只是盡量增大倍數，雖然能夠獲得更高的放大倍數的圖象，可是并不可能看出更多的細節，這種放大叫做“空的放大”。為了充分利用物鏡的分辨率，顯微鏡的總放大倍數相應也不能太小，不然的話本來可以看清楚的一些物體細節，會因為總放大倍數過小，擠在一起而分辨不出。

同一物鏡分辨率隨放大倍數增大而提高，隨倍數減小而降低，例如數值孔徑為0.65的物鏡，在總放大倍數小于一百六十倍的時候，分辨率降為7微米，當總放大倍數增至一千六百倍的時候，分辨率提高到1.6微米以上。

顯微鏡合適的總放大倍數決定于物鏡數值孔徑N.A.值的500倍至1000倍，假如N.A.值為0.65的40倍物鏡，合適的總放大倍數應為0.65x500倍。0.65x1000即325倍至650倍。所以，為了達到合適的總放大倍數應配合適當倍數的目鏡。

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